Возможность регенерации печени у экспериментальных животных с индуцированным циррозом при воздействии пространственно модулированного излучения эрбиевого лазера

Public Channel / Clinical Trials

Share on Social Networks

Share Link

Use permanent link to share in social media

Share with a friend

Please login to send this document by email!

Embed in your website

Select page to start with

2. 132 Введение Проблеме регенерации печени посвящено большое количество научных трудов и экспе - риментальных исследований [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7]. Это связано с тем, что заболевания печени имеют большую распространенность, а про - блемы их эффективного лечения далеки от решения. Возрастание медицинской и соци - альной значимости хронических заболеваний печени требует новых усилий в разработке во - просов лечения этих заболеваний [8, 9]. Цирроз печени – диффузный патологи - ческий процесс, протекающий с избыточным фиброзом и образованием структурно ано - мальных регенераторных узлов [10, 11, 12, 13]. Клинические проявления этого заболевания разнообразны и определяются, в основном, особенностями этиологических факторов, ак - тивностью патологического процесса, сниже - нием функции печени, а также степенью раз - вития портальной гипертензии. Несмотря на широкий арсенал фармакологических средств, у многих пациентов не удается достигнуть стойкой стабилизации процесса. Высокая ле - тальность при циррозах обусловлена развиваю - щимися осложнениями, требующими больших затрат на лечение [14]. Существует множество паллиативных методик продления жизни дан - ной категории пациентов, радикальная лишь одна – трансплантация органа. Трансплантация печени – высокотехноло - гичное дорогостоящее лечение, ограниченное недостаточным количеством донорских ор - ганов. Подготовка пациентов к транспланта - ции печени начинается с включения их в лист ожидания. Формирование листа ожидания трансплантации печени (ЛО ТП) и ведение пациентов до ортотопической трансплантации печени является важным аспектом работы лю - бого трансплантационного центра, от которой напрямую зависит исход операции. Пациенты, внесенные в ЛО ТП, являются потенциальны - ми реципиентами. Ввиду большой технической и материальной сложности, индивидуально - го медицинского подхода к каждому случаю, недостатка донорских органов осуществление данного оперативного вмешательства у всех пациентов, страдающих циррозом печени, не - возможно [15]. Поэтому остается актуальным поиск новых способов коррекции портальной гемодинамики в цирротически измененной печени для продления жизни у данной катего - рии пациентов перед трансплантацией печени. Кроме шунтирующих операций, одним из спо - собов коррекции портальной гемодинамики при циррозе печени может быть, с одной сто - роны, стимуляция внутрипеченочного неоан - гиогенеза и регенерации клеток печени, с дру - гой, – уменьшение количества соединитель - ной ткани в печеночных трактах, что позволит уменьшить явления портальной гипертензии. Такой подход для лечения данного заболева - ния является своеобразным «мостом» (medical bridging therapy) от момента постановки в ЛО ТП по поводу цирроза печени и предстоящей операцией по трансплантации печени. Параллельно с процессом оптимизации методов хирургической профилактики ослож - нений цирроза печени продолжается актив - ная работа по поиску различных современных способов стимуляции регенерации печени, позволяющих хотя бы частично восстановить ее структуру, поддержать функцию и продлить жизнь пациенту, дать возможность выполнить в последующем трансплантацию печени. Репаративная регенерация патологически измененной печени носит избирательный ха - рактер и направлена на восстановление стро - мально-паренхиматозных взаимоотношений за счет увеличения объема функционирую - щей паренхимы – так называемая регенера - ционная гипертрофия. При длительных вос - палительных процессах в печени (гепатитах: алкогольном, токсическом, вирусном, аутоим - мунном), жировой дистрофии (из-за ожире - ния, сахарного диабета или других нарушений обмена веществ), при циррозе печени на ме - сте поврежденных клеток образуется соедини - тельная ткань. С накоплением таких участков функция печени нарушается, изменяется ее строение (архитектоника) и развивается цир - роз. Поэтому другой возможный механизм воздействия – внутриклеточная и внеклеточ - ная резорбция избыточно образованного кол - лагена. Это позволит сохранить оптимальные стромально-паренхиматозные взаимоотноше - ния, адекватное кровоснабжение и функцио - нальную состоятельность органа. Нарушение репаративной регенерации служит специфиче - ской предпосылкой хронизации воспаления. В связи с этим, особое значение имеет изучение воздействия высокоэнергетичного лазерного излучения на цирротически измененную пе - чень с использованием современного меди - цинского лазерного оборудования. В настоящее время недостаточно освеще - ны в литературе вопросы регенерации гепато - цитов в патологически измененной печени под воздействием современных лазерных систем. В связи с этим, актуальным представляет - ся проведение комплексного сравнительного морфологического исследования в экспери - менте для получения достоверных данных о © И.И. Пикиреня с соавт. Регенерация печени при воздействии лазерного излучения

3. © Новости хирургии Том 23 * No 2 * 2015 133 процессах регенерации, происходящих в пато - логически измененной печени, их течении и изменчивости при воздействии на печеночную ткань лазерного излучения. Цель исследования – изучить возмож - ность регенерации печени у эксперименталь - ных животных с индуцированным циррозом при воздействии микроаблятивным методом при помощи пространственно модулирован - ного излучения эрбиевого лазера с длиной волны генерации 2,936 мкм. Материал и методы Экспериментальную работу проводили на базе вивария Научно-исследовательской лабо - ратории ГУО «Белорусская медицинская ака - демия последипломного образования». Учитывая данные литературы о воз - можности регенерации печении, а также собственные положительные данные о воз - действии эрбиевого лазерного излучения на кожные рубцы, мы провели эксперимент на белых крысах по изучению возможностей ре - генерации цирротически измененной пече - ночной ткани. Для формирования цирроза печени у крыс, подбора оптимальной токсической дозы и пути введения гепатотропного яда (тетрах - лорметана – ТХМ), на основании материалов, опубликованных в работах Т.Р. Мирсаева [16], было проведено предварительное эксперимен - тальное тестирование дозы и пути введения (подкожно или внутрижелудочно) ТХМ на 15 беспородных лабораторных крысах (самки и самцы). Животных содержали в условиях ви - вария при температуре 18-22°С со свободным доступом к воде. В течение всего эксперимен - та животные получали специализированное смешанное полнорационное питание. Перед началом проведения эксперимента животные находились в условия карантина 30 дней. В ходе исследования оценку состояния живот - ных проводили по макроскопическим крите - риям (масса тела, желтушность кожных по - кровов, выпадение шерсти, визуальная оценка состояния печени во время оперативных вме - шательств) и микроскопическим – гистологи - ческое исследование биопсийного материала, полученного при оперативном вмешательстве и естественной гибели животного. Поскольку масса тела животных является одним из са - мых объективных показателей общего состо - яния организма, в ходе эксперимента живот - ных подвергали регулярному взвешиванию на электронных весах. В соответствии с полученными резуль - татами предварительного экспериментально - го тестирования в дальнейшем эксперименте цирроз печени у крыс индуцировали внутри - желудочным введением ТХМ в течение 2 ме - сяцев по отработанной нами методике (Па - тент «Способ моделирования цирроза печени» МКИ G 09B 23/28, авторы Земляник А.Н., Пикиреня И.И.). Формирование цирроза через 2 месяца подтверждено как ультразвуковым исследо - ванием с использованием аппарата BK PRO FOCUS (USA) пальчиковым датчиком 12 МГц, так и морфологическим исследованием. После окончания введения животным ТХМ и получения гистологической картины цирроза печени в контрольной группе выполнены опе - ративные вмешательства. Дальнейшее экспериментальное исследо - вание выполнено в лабораторных условиях на 70 беспородных половозрелых белых крысах- самцах массой 160-250 г. Животным вводили тиопентал натрия и фиксировали в спинном положении. После обработки операционного поля в стерильных условиях производили оперативный доступ по белой линии живота. Печень выводили в рану с помощью лигатуры-держалки. В ходе опера - тивного вмешательства выполняли обработку цирротически измененной левой доли печени с помощью микроаблятивного метода с ис - пользованием эрбиевого лазерного излучения. Правую долю печени у каждого животного не обрабатывали, она служила для контроля. Брюшину ушивали кетгутом, апоневроз – не - прерывным нерассасывающимся материалом, а кожу – черным шелком, отдельными узло - выми швами. Все животные в эксперименте были раз - делены на 3 группы. 1-я группа (30 животных) – однократное вмешательство по вышеописанной методике с последующим выведением из эксперимента и гистологическим исследованием печени. 2-я группа (30 животных) – двукратное вмешательство по вышеописанной методике. В свою очередь, по срокам второго вмешатель - ства животные 2-й группы были разделены на 2 подгруппы (повторная обработка печени ми - кроаблятивным методом выполнена на 15-е и 30-е сутки). 3-я группа (10 животных) – контрольная, воздействие на цирротически измененную пе - чень эрбиевым лазерным излучением не вы - полняли. При оперативном вмешательстве исполь - зовали лазерный аппарат «Мультилайн» (про - изводства ООО «ЛИНЛАЙН Медицинские

5. © Новости хирургии Том 23 * No 2 * 2015 135 На 15-е и 21-е сутки у животных 1 группы при микроскопии сохранились изменения в виде отмеченных выше разрушений некоторых гепатоцитов. При этом не отмечено характер - ного термического поражения – коагуляции и коагуляционного некроза. Начиная с 21-х суток, были выявлены признаки регенерации цирротически изме - ненной печени у животных как 1-й, так и 2-й группы, включая уменьшение количества со - единительной ткани. Признаки регенерации печени были наиболее выражены у животных этих групп на 30-е сутки: в зонах воздействия наблюдался комплекс последовательных кле - точных реакций – активация тромбоцитов с дегрануляцией и образованием агрегатов, уве - личение количества тучных клеток, нарастание количества макрофагов и фибробластов, со - провождаемое усилением их функциональной активности, пролиферация эндотелиальных клеток с формированием нового сосудистого русла. При этом указанных признаков регене - рации в необработанной лазерным излучением правой доле печени и у крыс из 3-й группы не было выявлено. У животных первой группы на 52 сутки после первого оперативного вмешательства сохранялись вышеописанные признаки реге - нерации, на 60-е сутки признаки регенерации печени были выражены меньше, что подтвер - дилось по оцениваемым гистологическим при - знакам регенерации. Учитывая полученные данные, с целью поддержания процессов регенерации в печени нами было принято решение выполнить по - вторные операции с обработкой печени лазер - ным излучением на 15 и 30 сутки после перво - го оперативного вмешательства (1-я и 2-я под - группы 2-й группы, соответственно). После повторного воздействия микро- аблятивным методом у крыс второй группы при гистологическом исследовании так же, как и после первой обработки, выявлены измене - ния, которые не имели характерных призна - ков термического поражения. На всю глубину воздействия были отмечены локальные раз - рушения некоторых гепатоцитов. На 15 сутки после повторной обработки лазерным излуче - нием у крыс второй группы (1-я подгруппа), отмечались признаки регенерации цирротиче - ски измененной печени, включая уменьшение количества соединительной ткани (рис. 2). Как видно на рис. 3, на 30-е сутки после второй обработки у крыс (2-я группа 2-я под - группа) в печени в зоне воздействия микро - аблятивным методом имелось увеличение ко - личества тучных клеток, макрофагов и фибро - бластов, пролиферация эндотелиальных кле - ток с формированием нового сосудистого рус - ла. Выявлено уменьшение количества соеди - нительной ткани в цирротически измененной печени; имелись множественные кровеносные капилляры (неоангиогенез), пролиферация желчных протоков, уменьшалось количество ложных долек и соединительнотканных струк - тур. При этом указанных признаков регенера - ции в необработанной лазерным излучением правой доле печени и контрольной 3-й группе в различные сроки взятия гистологического материала не было выявлено (рис. 4). Таким образом, признаки регенерации пе - ченочной ткани наиболее выражены на 30-е сутки после второй обработки у крыс 2-й груп - Рис. 2. Печень крысы второй группы (1-я подгруп - па) после обработки микроаблятивным методом (15- е сутки после повторной обработки): 1 – ложные дольки печени с прослойками соединительной ткани; 2 – зона воздействия, богатая кровеносными сосуда - ми, пролиферирующими желчными капиллярами. В данной зоне отсутствуют прослойки соединительной ткани (глубина воздействия излучения – 50 мкм). Окраска гематоксилином и эозином. Ув. × 20. Рис. 3. Печень крысы второй группы (2-я подгруп - па) после обработки микроаблятивным методом (30 сутки). Окраска гематоксилином и эозином. Ув. × 20. 1 2

6. 136 пы 2-й подгруппы по сравнению с крысами 1-й подгруппы 2-й группы. В контрольной 3-й группе сохранялся цирроз печени без призна - ков регенерации, а именно: нарушена дольча - тая структура печени, множественные ложные дольки, жировая дистрофия гепатоцитов, ги - пертрофия ядер гепатоцитов, воспалительно- клеточная инфильтрация портальных трактов и паренхимы. В 3-й группе (контроль) на протяжении эксперимента и при его завершении были со - хранены признаки цирроза печени, что было подтверждено гистологически и данными уль - тразвуковой диагностики. На 52-е и 60-е сут - ки взятия гистологического материала в 1-ой группе, где выполнялась однократная обра - ботка, количество ложных долек, воспалитель - но-клеточной инфильтрации трактов в поле зрения значительно меньше, по сравнению с контрольной группой. На 52-е и 60-е сутки во 2-ой подгруппе 2-ой группы признаки реге - нерации наиболее выражены по сравнению с 1-й группой и 1-й подгруппой 2-й группы, а именно пролиферация эндотелиальных клеток с формированием нового сосудистого русла (неоангиогенез). Обсуждение Возникающие после однократной обра - ботки печени крыс микроаблятивным методом при помощи пространственно модулирован - ного излучения эрбиевого лазера изменения расценены как механическое разрушение от - дельных клеток. При этом не отмечалось ха - рактерных для термического поражения коа - гуляции и коагуляционного некроза. По нашему мнению, эффект механиче - ского разрушения биологических тканей воз - Рис. 4. Правая доля печени у крысы второй группы (2-я подгруппа) без воздействия - контроль (60 сут - ки). Окраска гематоксилином и эозином. Ув. × 20. никает как результат следующих процессов. Благодаря особой насадке лазерное излуче - ние вызывает микроабляции (50 × 50 × 50 мкм), генерируя на поверхности обрабатываемо - го объекта мощные акустические волны. Так как микроабляция происходит одновременно во многих точках, то и акустические волны, порожденные ею, являются синфазными, что делает возможным процесс их интерференции. Плотность энергии лазерных импульсов подо - брана таким образом, что после преобразова - ния лазерной энергии в энергию акустических волн, мощности этих акустических волн не - достаточно для независимого травмирования обрабатываемой биологической ткани. Одна - ко при локальном наложении соседних волн мощность воздействия возрастает до тех зна - чений, которые обеспечивают механическое разрушение тканей, находящихся в этих зонах. Учитывая, что сам механизм воздействия на клетки не термический, и зоны локального воздействия можно приблизить к размерам от - дельных клеток, вид разрушения представляет собой отдельные участки разрушенных тканей (клеток и их оболочек) в окружении нетрав - мированных, что и подтверждается данными микроскопии, выполненными в первые сутки после обработки печени. Таким образом, воздействие при помощи пространственно модулированного излучения эрбиевого лазера с длиной волны генерации 2,936 мкм (микроаблятивный метод) на печень с индуцированным циррозом у эксперимен - тальных животных приводит к регенераторным процессам в обработанной таким методом доле печени. Полученные результаты подтвержда - ют известный факт высокого регенераторного потенциала цирротически измененной пече - ни. Необходимы дальнейшие исследования с целью усиления эффекта микроаблятивного метода, изучения возможности клинического применения метода при терминальной стадии цирроза печени. Выводы 1. Действие микроаблятивного метода на цирротически измененную печень вызывает эффект механического повреждения некото - рых гепатоцитов. 2. Вследствие воздействия микроаблятив - ного метода в цирротически измененной пече - ни развивается активный процесс регенерации с явлениями неоангиогенеза и формирования желчных протоков. 3. Процесс регенерации наиболее выра - жен при двукратном воздействии микроабля - © И.И. Пикиреня с соавт. Регенерация печени при воздействии лазерного излучения

4. 134 Системы», Минск, Республика Беларусь), имеющий несколько независимых лазерных источников, включая эрбиевый, неодимовый, рубиновый, александритовый (оснащен 7-ми сменными высокоэнергетичными лазерными излучателями). В проводимом эксперименте использо - вали эрбиевый лазер с насадкой SMA (space modulated ablation), обеспечивающий необхо - димое пространственное распределение энер - гии в лазерном пучке (Евразийская заявка No 201200845/26 на изобретение «Способ обнов - ления биологических тканей и устройство для осуществления способа», авторы Хомченко В.В., Горбач Д.В., Суходолов А.В.). Обработку проводили в сканирующем режиме. Применя - лись следующие параметры излучения: - длина волны – 2.936 мкм; - длительность импульсов – 0.3 мкс; - усредненная плотность энергии – 2.1 Дж/см; - частота следования импульсов – 3 Гц. При данном типе воздействия на поверх - ности обрабатываемого объекта образуются структурированные зоны микроабляции, име - ющие размерности до 50 мкм в глубину, 50 мкм в диаметре и расположенные друг от дру - га на расстоянии 50 мкм (50 × 50 × 50 мкм). Все процедуры на лабораторных крысах и эвтаназию осуществляли в соответствии с требованиями «Европейской конвенции о за - щите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных це - лях», принятой в Страсбурге 18 марта 1986 г., и «Правилами проведения работ с использова - нием экспериментальных животных. После обработки левой доли печени ми - кроаблятивным методом в течение 2 месяцев на 1, 7, 15, 21, 30, 52, 60 сутки животных вы - водили из эксперимента путем передозировки эфирного наркоза с последующей декапитаци - ей. В процессе наблюдения оценивали общее состояние крыс. Визуально с фотофиксацией оценивалось состояние левой и правой долей печени с последующим морфологическим ис - следованием. Полученный в результате опера - ции участок печени подвергали гистологиче - скому исследованию с постановкой оконча - тельного диагноза. Фрагмент печени, взятый для гистологического исследования, фикси - ровали в 10%-растворе нейтрального форма - лина и готовили парафиновые срезы, которые окрашивали по Ван-Гизон, суданом-III с це - лью выявления жировых вакуолей, их формы и преимущественной локализации. ШИК- реакция использовалась для выявления глико - протеинов, а краситель MSB (Martius-Scarlett- Blue) – для окраски и выявления компонентов соединительной ткани. При световой микроскопии изучали об - щую картину, оценивали степень выражен - ности основных гистологических признаков цирроза печени, отражающих состояние дис - трофических, воспалительно-некротических, склеротических и регенераторных процессов в печени как со стороны паренхиматозных, так и со стороны стромальных элементов: жировая дистрофия гепатоцитов, содержание гликогена в цитоплазме гепатоцитов, некроз печеночных клеток, гипертрофия ядер гепатоцитов, про - лиферация эпителия желчных протоков, вос - палительно-клеточная инфильтрация трактов и паренхимы, число ложных долек. Результаты После однократной обработки печени крыс микроаблятивным методом при помощи про - странственно модулированного излучения эрби - евого лазера при микроскопии в первые сутки во всех группах в печеночной ткани выявлены признаки уже имеющегося цирроза печени (жи - ровая дистрофия гепатоцитов, некроз печеноч - ных клеток, гипертрофия ядер гепатоцитов, вос - палительно-клеточная инфильтрация трактов и паренхимы, наличие ложных долек). Кроме того, на глубину воздействия имеются явления локаль - ного разрушения некоторых гепатоцитов. Глуби - на воздействия составила от 5,5 до 6,0 мм (рис. 1). На 7-е сутки у крыс из 1-й и 2-й групп при гистологическом исследовании печени со - хранены основные признаки цирроза печени: наличие ложных долек, жировой дистрофии печени, воспалительно-клеточной инфильтра - ции трактов и паренхимы, перипортального склероза и зональных некрозов. Рис. 1. Печень крысы первой группы после обработ - ки микроаблятивным методом (первые сутки). Окра - ска по Ван-Гизон. Ув. × 20. © И.И. Пикиреня с соавт. Регенерация печени при воздействии лазерного излучения

7. © Новости хирургии Том 23 * No 2 * 2015 137 тивным методом с интервалом в 30 дней. 4. Целесообразно клиническое примене - ние микроаблятивного метода при терминаль - ной стадии цирроза печени с целью регене - рации в качестве Bridge-терапии перед транс - плантацией печени. 5. Необходимо проведение дополнитель - ных исследований по оптимизации параметров используемого излучения с целью увеличения глубины воздействия и усиления эффекта ре - генерации цирротически измененной печени. Конфликт интересов отсутствует ЛИТЕРАТУРА 1. Киясов А. Л. Трансплантация аутогенных гемо - поэтических стволовых клеток больным хрониче - ским гепатитом / А. Л. Киясов, А. Х. Одинцова, А. А. Гумерова // Клеточ. трансплантология и ткане - вая инженерия. – 2008. – Т. 3, No 1. – С. 70–75. 2. Морфологические изменения печени после ее ре - зекции и введения биоматериала Аллоплант / А. Х. Мустафин [и др.] // Морфол. ведомости. – 2008. – No 3-4. – С. 58–61. 3. Участие клеток Ито в гистогенезе и регенерации / А. А. Гумерова [и др.] // Клеточ. трансплантоло - гия и тканевая инженерия. – 2007. – Т. 2, No 4. – С. 39–46. 4. Gilgenkrantz H . New insights into liver regeneration / H . Gilgenkrantz , A . C . de l ' Hortet // Clin Res Hepa - tol Gastroenterol . – 2011 Oct . – Vol . 35, N 10. – P . 623–29. doi : 10.1016/ j . clinre .2011.04.002. 5. Лукаш В. А. Взаимовлияние ПОЛ и фосфолипид - ного обмена в субклеточных фракциях регенериру - ющей печени в условиях стресса и при предвоз - действии адреналином в возрастном аспекте / В. А. Лукаш, В. Н. Мещанинов // Госпит. вестн. – 2007. – No 2. – С. 33–38. 6. The epidermal growth factor receptor: a link between inflammation and liver cancer / C. Berasain [et al.] // Exp Biol Med. – 2009 Jul. – Vol. 234, N 7. – P. 713– 25. doi: 10.3181/0901-MR-12. 7. Morphogenesis of chicken liver: identification of lo - calized growth zones and the role of b-catenin/Wnt in size regulation / S. Suksaweang [et al.] // Dev Biol. – 2004 Feb 1. – Vol. 266, N 1. – P. 109–22. 8. Алкогольные и вирусные циррозы печени у ста - ционарных больных (1996-2005 гг.) : распростра - ненность и исходы / А. И. Хазанов [и др.] // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопрокто - логии. – 2007. – No 2. – С. 19–27 9. Чирский В. С. Биопсийная диагностика неопухо - левых заболеваний печени / В. С. Чирский. – СПб. : СПб МАПО, 2009. – 80 с. 10. Ивашкин В. Т. Аутоиммунные заболевания пе - чени в практике клинициста / В. Т. Ивашкин, А. О. Буеверов. – М. : М-Вести, 2011. – 112 с. 11. Ивашкин В. Т. Алкогольно-вирусные заболева - ния печени / В. Т. Ивашкин, М. В. Маевская. – М. : Литтерра, 2007. – 176 с. 12. Systemic infusion of angiotensin II exacerbates liver fibrosis in bile duct ligated rats / R. Bataller [et al.] // Hepatology. – 2005 May. – Vol. 41, N 5. – P. 1046–55. 13. Mouse models of liver fibrosis mimic human liver fibrosis of different etiologies / A. K. Martinez [et al.] // Curr Pathobiol Rep. – 2014 Dec 1. – Vol. 2, N 4. – P. 143–53. 14. Котив Б. Н. Портокавальное шунтирование в лечении больных циррозом печени с синдромом портальной гипертензии / Б. Н. Котив, И. И. Дзид - зава, С. А. Алентьев // Анналы хирург. гепатологии. – 2008. – Т. 13, No 4. – С. 76–84. 15. Alqahtani S . A . Update in liver transplantation / S . A . Alqahtani // Curr Opin Gastroenterol . – 2012 May . – Vol 28, N 3. – P . 230–38. doi : 10.1097/ MOG .0 b 013 e 3283527 f 16. 16. Мирсаев Т. Р. Гепатопротекторное действие ок - симетилурацила / Т. Р. Мирсаев // Фармация. – 2007. – No 2. – С. 34–35. Адрес для корреспонденции 220013 Республика Беларусь, г. Минск, ул. П. Бровки, д. 3, корп. 3, ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», кафедра трансплантологии, тел. моб: +375 29 275-07-50, e-mail: pik-med@tut.by, Пикиреня Иван Иванович Сведения об авторах Поступила 20.10.2014 г. Пикиреня И.И., к.м.н., доцент, заведующий кафедрой трансплантологии ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования». Земляник А.Н., заочный аспирант кафедры транс - плантологии ГУО «Белорусская медицинская акаде - мия последипломного образования». Хомченко В.В., директор ООО «ЛИНЛАЙН Меди - цинские Системы».

1. © Новости хирургии Том 23 * No 2 * 2015 131 ЭК Ñ ПЕ ÐÈ МЕ ÍÒ АЛЬ Í АЯ ÕÈÐÓÐÃÈ Я И.И. ПИКИРЕНЯ 1 , А.Н. ЗЕМЛЯНИК 1 , В.В. ХОМЧЕНКО 2 ВОЗМОЖНОСТЬ РЕГЕНЕРАЦИИ ПЕЧЕНИ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ С ИНДУЦИРОВАННЫМ ЦИРРОЗОМ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРОСТРАНСТВЕННО МОДУЛИРОВАННОГО ИЗЛУЧЕНИЯ ЭРБИЕВОГО ЛАЗЕРА ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования» 1 , ООО «ЛИНЛАЙН Медицинские Системы» 2 , г. Минск, Республика Беларусь Novosti Khirurgii. 2015 Mar-Apr; Vol 23 (2): 131-137 The Ability to Regenerate the Liver in Experimental Animals with Induced Cirrhosis under the Influence of the Spatially Modulated Erbium Laser I.I. Pikirenia, А.N. Zemlyanik, V.V. Khomchenko Цель . Изучить возможность регенерации печени у экспериментальных животных с индуцированным циррозом при воздействии микроаблятивным методом при помощи пространственно модулированного из - лучения эрбиевого лазера с длиной волны генерации 2,936 мкм. Материал и методы . В эксперименте на 70 белых беспородных крысах моделировался цирроз печени с помощью тетрахлорметана. Цирротически измененная левая доля печени у каждой крысы обрабатыва - лась с использованием микроаблятивного метода (эрбиевый лазер с длиной волны генерации 2,936 мкм, длительностью импульса 0,3 мкс, с насадкой SMA (space modulated ablation), обеспечивающей простран - ственное распределение энергии в лазерном пучке), правая доля служила контролем. Повторные операции с обработкой печени выполнялись в на 15-е, 30-е, 60-е сутки с последующим выведением из эксперимента и гистологическим исследованием печени. Результаты . После однократной обработки печени крыс пространственно модулированным эрбие - вым лазерным излучением при микроскопии в первые сутки воздействия в печеночной ткани констати - рованы признаки уже имеющегося цирроза печени и на глубину воздействия (от 5,5 до 6,0 мм) выявлены разрушения некоторых гепатоцитов. Начиная с 30-х суток, выявлены признаки регенерации цирротически измененной печени, включая уменьшение количества соединительной ткани и признаков портальной ги - пертензии. При этом указанных признаков регенерации в необработанной лазерным излучением правой доле печени не выявлено. После двукратной обработки печени на 60-е сутки были выявлены неоангио - генез, пролиферация желчных протоков, уменьшение количества ложных долек и соединительнотканных структур, по сравнению с правой долей печени, обработка которой не проводилась. Заключение. Воздействие микроаблятивного метода на цирротически измененную печень вызывает активный процесс регенерации, что в дальнейшем может быть использовано в качестве Bridge-терапии перед трансплантацией печени. Ключевые слова: цирроз печени, высокоэнергетичное лазерное излучение, регенерация печени, транс - плантация печени, соединительная ткань, клеточная пролиферация, Bridge-терапия Objectives. To study the possibility of the liver regeneration with induced cirrhosis using micro-ablative method with spatially modulated erbium laser radiation (wavelength of 2,936 μ m) in experimental animals. Methods. In the experiment the liver cirrhosis was modeled in 70 albino outbred rats by means of carbon tetrachloride. Cirrhotically changed left liver lobe was treated by micro-ablation method (erbium laser, wavelength of 2,936 μ m , impulse duration of 0,3 ms, packed with SMA (Space Modulated Ablation), the right lobe was a control one. The repeated operations with the treating of the liver have been carried out on the 15 th , 30 th , 60 th days, followed by exclusion from the experiment and histological examination of the liver. Results. After a single treating of the rats’ liver with spatially modulated erbium laser radiation at microscopy on the first day of exposure the signs of pre-existing liver cirrhosis in the hepatic tissue so as on the depth of exposure (from 5,5 to 6,0 Mm) the destruction of some hepatocytes were revealed. Starting from the 30 th day the regeneration signs of cirrhotically changed liver were established, including the reduction of the connective tissue amount and signs of the portal hypertension. At the same time no signs of regeneration in the right liver lobe not subjected to laser radiation were revealed. On the 60 th day after double liver treating neoangiogenesis, proliferation of the bile ducts, reduction of the number of false lobules and connective tissue structures have been registered compared to the right lobe of the liver, which treating is not performed. Conclusion. The impact of the micro-ablative method on the cirrhotically changed liver causes active process of regeneration that may be indicated for application Bridge-therapy prior to liver transplantation. Keywords: liver cirrhosis, high energy radiation, liver regeneration, liver transplantation, connective tissue, cell proliferation, Bridge-therapy

Views

  • 94 Total Views
  • 60 Website Views
  • 34 Embeded Views

Actions

  • 0 Social Shares
  • 0 Likes
  • 0 Dislikes
  • 0 Comments

Share count

  • 0 Facebook
  • 0 Twitter
  • 0 LinkedIn
  • 0 Google+

Embeds 3

  • 5 139.162.151.236
  • 6 139.162.151.236:8069
  • 2 www.linline-ms.com